2017年卫生资格检验技师临床血液学考点

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　　再生障碍性贫血实验诊断

　　(1)概念：是由多种原因致造血干细胞减少或功能异常，从而引起红细胞、中性粒细胞、血小板减少的一种获得性疾病。表现为贫血、感染和出血。与造血干细胞受损、造血微环境损伤及免疫介导有关。

　　(2)血象与骨髓象特点：呈正细胞正色素性贫血，可有小细胞增多。网织红细胞极低，血小板计数早期减少。骨髓各穿刺部位大多增生不良，白细胞常低于2×109/L，粒细胞显著减少，多为淋巴细胞，骨髓巨核细胞减少。骨髓活检对再障的诊断具有十分重要价值。

　　(3)再生障碍性贫血的诊断标准：①全血细胞减少，网织红细胞绝对值减少;②一般无肝、脾肿大;③骨髓至少1个部位增生减低或重度减低，骨髓小粒非造血细胞增多;④能引起全血细胞减少的其他疾病，如阵发性睡眠性血红蛋白尿症、骨髓增生异常综合征中的难治性贫血等;⑤一般抗贫血药物治疗无效。

　　胆碱酯酶肝病检测意义

　　人体组织中有两种胆碱酯酶，一种是分布在红细胞和神经组织中的乙酰胆碱酯酶(又称真性胆碱酯酶);另一种是广泛分布于血浆及许多非神经组织中的假性胆碱酯酶(非特异性胆碱酯酶)，我们一般称假性胆碱酯酶(CHE)。CHE是一种生物酶，具有降解胆碱酯并在自主神经系统和肌肉运动系统中起神经传递的功能，它存在于血清、肝、大脑、肾、肠及胰中，对其检测常被用于有机磷中毒患者的辅助诊断。由于CHE是由肝脏生成后分泌入血的，所以它还能反映肝实质细胞损害的程度。因此，胆碱酯酶是一项具有重要临床意义的的肝功能检测指标。

　　1、急性肝炎此组患者的ALT均>200U/L，血清CHE降低者有17例，占的比例是65%，比有关文献报道的比例高，我们可以将CHE的测定作为一项急性肝炎有价值的辅助酶学指标。

　　2、肝硬化此组患者肝脏的功能性细胞减少，使蛋白质合成降低，故其CHE均降低。值得注意的是部分肝硬化病例的ALT等一般肝功能指征不高或无明显异常，而CHE明显降低，提示CHE对肝硬化的诊断和病情观察是一项有特色的指征之一。

　　3、肝癌本组患者的CHE明显降低，其下降幅度与肝细胞损害程度呈正相关，而ALT的升高与肝组织病理无固定关系。

　　4、大三阳与小三阳临床上大、小三阳患者区别在于病毒的复制不同。大三阳患者血清中能同时检测出HBsAg、HBeAg、抗HBC，提示急慢性的HBV感染，而且有病毒复制;小三阳患者血清中能检测出HBsAg、抗HBe、抗HBC，提示HBV在肝细胞内复制极低或停止。CHE在大三阳组的32例中有4例降低，约占13%，在小三阳组的38例中只有2例降低，因此，我们认为临床上区别大、小三阳患者，不能预示其肝脏功能改变的程度。

　　CHE在肝脏受损时活力下降，是肝脏病变后唯一下降的酶，特别是蛋白质合成受损时的肝病，其降低幅度与血清白蛋白大致平行。因此，CHE在肝病的诊断及治疗中是一项很有价值的检测指标。

　　高铁血红蛋白血症

　　高铁血红蛋白血症(HbM)：也称高铁血红蛋白M病，是由于血红蛋白肽链中α87、β92、α58、β63位组氨酸被酪氨酸取代，酪氨酸酚侧链上的羟基(-OH)与二价铁离子结合，形成稳定的高铁血红蛋白(MetHb)而失去携氧能力，引起紫绀。血液呈紫色，试管内通氧不变鲜红。pH7.1缓冲液血红蛋白电泳HbM与HbA分离较开，溶血液氰化后吸收高峰消失，部分HbM热变性试验呈阳性。

　　慢性髓系白血病

　　(1)慢性髓细胞白血病(CML)：

　　Ph阳性CML：t(9;22)染色体异常，又称ph染色体，染色体及G6PD同工酶的分析证实，CML的病变细胞累及髓系细胞(粒、红、巨核细胞系)及B细胞。

　　Ph阳性CML：多见于以下两种情况：一种见于60岁以上的男性，无t(9;22)染色体异常，脾不大或轻度肿大，白细胞计数<5×109/L。另一种称幼儿型CML(juv-CML)，见于3岁以下的婴儿，其临床表现与成人CML相似，但多为ph阴性，胎儿血红蛋白(HbF)常升高，HbA2降低。

　　(2)慢性嗜中性粒细胞白血病(CNL)：多见于60岁以上病人，白细胞总数持续升高，多>30×109/L，以成熟中性粒细胞为主，中性粒细胞碱性磷酸酶积分多在300分以上，无ph染色体，骨髓涂片示粒细胞极度增生，嗜酸及嗜碱性粒细胞不多，红系明显受抑，巨核多正常。

　　(3)慢性嗜酸性粒细胞白血病(CEL)：多见于男性，特征为嗜酸性粒细胞明显增多，尚存在不成熟的嗜酸性粒细胞及原始细胞，贫血、血小板增多可减少，ph多阳性。病例可有肝脾淋巴结肿大，易发生心脏纤维化，心肌嗜酸性粒细胞浸润、难治性心衰、中枢神经系统易受累。

　　抗人球蛋白试验原理

　　原理：抗人球蛋白试验(Coombs试验)检测自身免疫性溶血性贫血的自身抗体(IgG)。分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验(DAGT)和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验(IAGT)，以前者最常用。直接试验应用抗人球蛋白试剂(抗IgG和/或抗C3d)与红细胞表面的IgG分子结合，如红细胞表面存在自身抗体，出现凝集反应。间接试验应用Rh(D)阳性O型正常人红细胞与受检血清混合孵育，如血清中存在不完全抗体，红细胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出现凝集。

　　转铁蛋白测定原理

　　免疫散射比浊法：利用抗人转铁蛋白血清与待检测的转铁蛋白结合形成抗原抗体复合物，其光吸收和散射浊度增加，与标准曲线比较，可计算出转铁蛋白含量。目前还有放射免疫法和电泳免疫扩散法。

　　参考值：免疫比浊法：28.6～51.9μmol/L(220～400mg/dl)。

　　珠蛋白肽链分析

　　珠蛋白肽链分析原理：尿素或对氯汞苯甲酸能破坏血红蛋白的空间结构，血红蛋白的珠蛋白可被裂解成肽链亚单位，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离出各肽链区带。

　　参考值 HbA裂解后有四条带，可泳出四条带，分别为β、HbA、HbA2、α带。

　　临床意义：①若有异常血红蛋白，则出现异常Hb和异常肽链。 ②肽链合成速率检测对地中海贫血诊断有参考价值。 ③聚合酶链反应(PCR)扩增结合等位特异寡核苷酸(ASO)探针杂交诊断法(PCR-AS0法)是目前采用的最常用的诊断α-珠蛋白生成障碍性贫血或β-珠蛋白生成障碍性贫血的方法。

　　红细胞酶代谢与功能

　　1.维持红细胞能量代谢的主要酶

　　(1)与糖代谢有关酶：丙酮酸激酶(PK)、2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)、葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)等。

　　(2)谷胱甘肽还原酶系统。

　　(3)高铁血红蛋白还原酶系统。