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2017检验技师考试化学检验：孕酮(P)的主要功能与检测
导语：孕酮(progesterone，P)是21C类固醇激素，由胆固醇经孕烯醇酮通过异构酶转化而成。在非妊娠妇女，卵巢中的卵泡膜细胞产生P，妊娠期间，P则主要由胎盘合体滋养细胞层分泌，故血中P水平主要与胎盘重量及血液灌注量相关。
孕酮(P)：女性主要由卵巢和胎盘产生。
孕酮的主要功能是促进子宫内膜增厚，腺体增生，为受精卵植入做准备。
从孕酮浓度的升降可以推测卵巢滤泡和黄体的活动，因此血液中孕酮测定在临床上用于监测未怀孕妇女的排卵和黄体的正常功能，孕酮疗法监控及早期妊娠的评价等，在判断黄体功能状态上具有特别重要的意义。对不怀孕妇女和反复自然流产妇女可帮助查找原因。在月经周期中，孕酮的浓度：滤泡期：0.14～1.61μg/L.排卵期后明显上升，黄体期达：2.41～31.2μg/L，并与血中E2的增加平行。
妊娠足月时可高达：150～200μg/L.血清孕酮的升高：见于葡萄胎、轻度妊娠高血压综合征、糖尿病孕妇、多胎、继发性高血压、先天性17-a羟化酶缺乏症、先天性肾上腺增生、卵巢颗粒层膜细胞瘤、卵巢脂肪样瘤。
孕酮的降低：见于先兆流产、黄体功能不良、胎儿发育迟缓、死胎、严重妊娠高血压综合征。
在月经周期第18～26天，测三次血P，如均小于15.9nmol/L(5ng/ml)可诊为黄体功能不健。
注意事项
1、标记品和标准品均由无水乙醇配制，容易挥发，应将盖子塞紧，贮于4℃冰箱。
2、抗血清稀释成母液后应存放在4℃，切勿放-20℃低温处，以免反复冻融，降低抗血清效价。
3、明胶、活性炭、葡聚糖等试剂应放在阴干燥处。
4、0.1% GPS在夏天，即使放在4℃，也很容易变质，最好一次配量不要太多。如发现明显混浊、发臭等变质现象，应予重配。
5、在进行B、F分离时，由于DCC时样品需保持恒定的接触吸附时间，所以一批加样管数不可能太多，时间不能太长，控制在3～5min内加完，待离心分离后，再加第二批。
6、在吸取活性炭溶液(DCC)时，必须保证DCC溶液的充分混匀，以免因DCC浓度的不均而影响分离效果。
7、抽提用CH2Cl2和配制用的无水乙醇必须重蒸后使用。
检查过程
1、标准曲线制作：分别为0，10，20，50，100，200，400pg(复管)，60℃水浴压缩空气吹干，加补孕酮11000dpm/20μl吹干，各管加1∶5万0.2ml抗体，4℃恒温过夜，次日加5g/L GPS 0.1ml，2.5g/L DCC 0.5ml，4℃放置10min，3000r/min离心10min吸出上清液0.4ml，加到8ml闪烁液中，混旋1min，避光放4h后用液烁仪测量。
另取四管，各加3H-孕酮11000dpm/20μl，吹干，加1g/L,GPS其中二管作总脉冲(T)。另二管作非特异性测定管(BN%)，BN%DCC分离法同标准曲线制作。
2、未知样品的检测：孕妇取血浆0.05ml或0.1ml，未孕妇或男性取0.2ml，于具塞试管中用重蒸馏水补足剂0.5ml，加0.1mol/L NaOH0.2ml，重蒸二氯甲烷5ml，抽提5min，静置，弃去上层液，二氯甲烷用蒸馏水洗2次，每次1ml，清洗，1500r/min离心3min，吸取二氯甲烷抽提液双份1ml，置45℃水浴蒸干，加3H-孕酮11000dpm/10μl，吹干，加1∶5万抗体0.2ml，以下操作与标准曲线相同。
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